干货!PCR实验室大面积污染有救了
做pcr的小伙伴都知道,如果实验室出现了大面积核酸气溶胶污染,是非常难以清除的,长期释放污染核酸,是会导致实验室停工的。所以大多数人在做pcr实验时,都会谨慎认真,在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都分外注意。
那大面积核酸气溶胶污染真的如大家所说,是不可逆的吗?这里就要开始用数据说话了
图上的A1-A7分别代表了阳性对照、试纸、双蒸水、异丙醇、70%乙醇、PCR Cleaner。在分别使用双蒸水、异丙醇、乙醇、PCR Cleaner 对每个孔进行相应清洁操作后,加入RT-PCR扩增体系后,可以明显看出PCR Cleaner能够有效清除DNA/RNA核酸分子。
这样的话,核算污染就有了全面的应对措施。
(1)对污染区域使用核酸气溶胶污染清除剂(PCR Cleaner)进行大面积处理,包括:地板、墙面、天花板、门、窗户等地方,同时加大通风量(内循环无用,尽可能外循环);
(2)对污染区域内的设备使用核酸气溶胶污染清除剂(PCR Cleaner)进行反复处理;对超净台等含有空气过滤系统的设备,请更换过滤网;对移液器等污染设备采用核酸气溶胶污染清除剂(PCR Cleaner)进行清洗,高温灭菌;
(3)待污染区域及设备器件清理完成后,使用紫外灯辐照4小时以上;
(4)可请保洁员按照上述要求(1)(2)(3)连续清理三天;
(5)设计实验对照组(根据污染源基因片段),进行阴阳对照实验,根据阴性对照确认污染情况,可采用8连排PCR管(2个阳参+6个阴参);若阳参起跳,阴参起跳,则污染需要继续清理;若阳参起跳,阴参全部不起跳了,则说明污染得到控制,可恢复正常实验。
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