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智荟锦囊之经典配方干粉培养基的配制方法

来源：Cytiva（思拓凡）分类：应用方案 2024-04-12 13:12:07 11阅读次数

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HyClone拥有CHO、HEK293、Vero、昆虫等多种细胞培养平台，可以用于抗体、疫苗、重组蛋白以及病毒等多种产品，同时还提供经典配方培养基系列产品。目前，HyClone可以以干粉或者液体形式提供包括DMEM、DMEM/F12、M199、MEM、RPMI 1640等数十种经典培养基，并可以根据客户的需求提供定制化服务。

表1：部分经典配方培养基^[1]

除了选择即用型的液体培养基之外，如何配制干粉培养基也是智荟专线经常收到客户来电咨询的热点问题之一，本篇智荟锦囊带大家一探究竟。

干粉培养基配制方法

干粉培养基存储要点：

干粉培养基是极易吸湿的，请注意干燥保存。建议在原包装中密封保存在2-8 ℃。开封后，建议最好将全部干粉尽快一次性配制完。不恰当的保存条件和使用习惯可能会导致干粉培养基变质，并出现如下的现象：

粉末结块而非自由流动；

颜色从骨白色变为黄橙色，并伴有明显的气味；

无法完全溶解。

干粉培养基配制指南：

以HyClone货号SH30003.03 DMEM/HIGH干粉培养基为例，详细的配制方法如下^[2]：

以13.4 g/L的质量浓度称量本次配制所需使用的DMEM/HIGH干粉培养基，例如准备配制终体积为10 L的DMEM/HIGH液体培养基，那么需要称量134 g的干粉以备使用。注意，如果用掉包装内的全部干粉，建议用水彻底冲洗包装的内表面以获得全部干粉；

配制时所使用的搅拌装置要比需要配制的最终体积大一些，称量总体积90%的细胞培养用水；

在轻轻搅拌的同时，缓慢加入称量好的干粉，水温需控制在15-30 ℃，搅拌直至干粉全部溶解；

DMEM/HIGH培养基需要额外加入终浓度为3.7 g/L的碳酸氢钠，例如本次准备配制终体积为10 L的DMEM/HIGH液体培养基，那么需要称量37 g碳酸氢钠粉末并加入，轻轻搅拌直至粉末全部溶解，也可以使用HyClone碳酸氢钠溶液（货号SH30033.02，浓度为7.5%的碳酸氢钠水溶液），添加量为49.3 mL/L；

在搅拌过程中，使用1.0 mol/L的盐酸或1.0 mol/L的氢氧化钠调节溶液的pH值，调整标准需比工作pH低0.1-0.3个单位（DMEM/HIGH培养基的工作pH为7.0-7.4），当pH值稳定后，在缓慢搅拌的同时补充细胞培养用水定容至最终体积；

立即用0.2 μm或更小孔径的过滤器进行过滤，在过滤过程中，pH值通常会上升0.1-0.3个pH单位；

分装过滤后的溶液至无菌容器中，置于2-8 ℃ 避光保存即可。

对于不同的经典配方干粉培养基，上述的基本流程保持一致，而干粉的质量浓度、需额外加入的碳酸氢钠浓度以及培养基的工作pH都有所不同，详细信息可以参考下方表2：

表2：经典配方干粉培养基的称重列表^[2]

小Tips：

HyClone产品中货号SH30003.01与SH30003.02所代表的是相同的产品：DMEM/HIGH干粉培养基，不同之处在于包装规格的大小，SH30003.01是10×1 L的包装而SH30003.02是2×5 L的包装。同样对于液体培养基而言，货号后.01一般是500 mL瓶装而货号后.02一般是1000 mL瓶装，货号后. FS一般是6×500 mL瓶装而货号后.LS一般是6×1000 mL瓶装。

HyClone无血清干粉培养基的配制方法，请参考对应产品的数据文件Data File，数据文件可以在中文官网 (www..com.cn) 搜索产品名称或货号，在对应产品页面的相关文档处进行下载。

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参考文献：

[1] HyClone 产品选择指南.CY15332-21Jul-BR

[2] Powdered media and balanced salts. Data File. CY13710-03Sep20-DF

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