本文依据中华医学会分会临床化学学组2020年起草的《生化分析仪污染分析评估及处理方法专家共识》（以下简称《共识》），重点生化分析仪所带污染物的来源、特点及带污染物的方式。 从三个方面解读了携带污染的评估程序和方法以及常用的解决方案，以指导实验室工作人员正确识别和评估携带污染，有效减少携带污染造成的结果偏差对患者诊断和治疗的影响。治疗。

携带污染定义：

中华人民共和国医药行业标准《全自动生化分析仪》（YY/T0654-2017）中，携带污染定义为“通过测量从一个测试样品反应中携带到另一测试样品反应中的分析物的不连续量”。系统。” ，从而错误地影响另一个被测样品的性能”，特指样品的携带。这一概念在2020年共识中得到了扩展：生化检测系统携带的污染被定义为“物质（生物样品、试剂、混合反应溶液）上一生化检测过程中残留的、通过仪器部件（包括但不限于探针、比色杯、搅拌棒、管道等）的残留物被带入下一个生化检测反应，参与下一步的生化检测反应。反应，影响反应过程，直接或间接干扰比色或浊度等，造成检测结果显着偏差的过程”。通过对专家共识中携带污染定义的解读，携带污染的存在污染会导致实验室结果超出最大允许误差或影响临床决策。 造成污染的原因有很多。 根据携带残留的不同，可分为：（1）样品携带污染（生物携带污染）； (2)试剂携带污染(化学携带污染，包括稀释液、洗涤液、反应混合物、反应产物等)。 根据携带污染发生的部位，可分为：（1）样品探针携带污染； (2)试剂探针被污染； (3)比色皿被污染； (4)搅拌棒被污染； (5)管道携带污染等。

关于不同类型夹带污染的来源和特点

1、携带污染的共同特点：一是日常工作中难以通过室内质量控制和常规性能验证来检测。 往往表现为检测结果与临床实践不符，排除仪器、试剂的常见原因后仍无法解释（这是实际工作中比较常见的情况，也是临床医生质疑检测结果的主要原因之一）； 其次，携带污染的频率会随着项目数量和检测量的增加而增加，即检测项目越多，携带污染的机会就越大； 最后，残留污染的频率和严重程度与仪器的状态和项目安排的顺序直接相关，特别是对于开放试剂。 大多数实验室在首次使用生化分析仪时并未发现携带污染。 但随着同种试剂和物品使用寿命的延长，如果更换备件或维护不理想，携带污染会显着增加。

2. 样品残留污染的来源和特征：样品残留污染通常是由于样品探针、样品托盘（用于样品转移或预稀释）或连续流生化分析仪管道等携带的样品残留造成的，以及是由比色皿引起的。 由于比色皿反应混合物中样品的比例非常低，因此来自残留物的样品残留污染的比例非常小。 采样探头的磨损以及管道清洁和维护不良会大大增加样品传播污染的发生。 另外，对于含有分离胶的黄色真空采血管，分离胶本身的质量可能会导致样品针挂胶，从而造成样品残留污染。

3、样品残留污染主要发生在以下几种情况：①受试物浓度范围很宽的物品，如肌酸激酶、类风湿因子等，在某些疾病发生时可能会增加数千倍。 此时，即使是极少量的样品探针，也可能导致后一个样品的检测结果异常升高。 ② 不同样品类型的待测物质浓度差异较大。 当它们在同一生化检测平台上近距离测量时，也会带来明显的残留污染。

4、试剂残留污染常见于以下两种情况：①残留试剂被试剂探头直接携带进入下一个反应系统； ②反应混合物通过搅拌棒或比色皿带入下一个反应系统。 原因比较复杂。 这不仅仅是试剂本身对另一种试剂的影响。 各种添加、搅拌、清洁等可能会导致残留污染。

5、试剂携带污染最典型的特征：通常会发生“配对”，即某个特定检测项目的试剂或其他化学残留物被带入随后的另一个特定检测项目的反应系统中。 试剂残留污染影响检测结果的可能因素有很多，比较常见的包括以下三类：一是试剂组分之间的直接影响，即前次反应的试剂组分中含有分析物下一个反应或其类似物； 另一种是试剂组分之间的间接影响，即前一反应试剂中的某些组分与后一反应过程中的某些关键中间产物发生反应或影响反应条件； 另一类是反应产物的影响，即前次反应残留试剂中所含的某些成分或反应产物直接影响后次反应的吸光度值。

评估自动生化分析系统污染的程序

（一）夹带污染评价的时间和方法

1、新生化分析系统投入使用前的评估： ①样品源污染评估：建议选择样品量较大和/或样品浓度范围较宽的项目，并设计实验验证是否存在污染。是样品携带的污染及其对结果的影响程度。 是否超出临床可接受的范围。 测试可以使用显色物质或临床样本。 ②试剂源污染评估：分为封闭式检测系统和开放式检测系统。 封闭式检测系统可以收集和汇总制造商手册或客户文件中提供的“配对”交叉污染信息，并根据临床实验室计划进行的测试项目和数量评估试剂传播污染的可能性； 而开放式检测系统可以通过文献查阅来收集和总结交叉污染信息。 以及数据汇总等，评估实验室拟开展的项目是否存在交叉污染的可能性，并采取相应措施。 共识提到，无论是封闭式检测系统还是开放式检测系统，如果没有完整的项目之间携带的污染信息，制造商必须协助客户对两个项目之间携带的污染进行系统评估，然后确定项目设置方案。

2、定期评估： ① 即使在规定的备件、耗材使用寿命和更换期限内，全自动生化分析仪的性能也可能会衰减。 因此，建议根据系统使用寿命、使用时间、设备状况确定携带污染评估周期。 ② 定期评估可以使用特定样品对特定检测项目（如分析系统使用前评估中证实的携带污染和/或工作中发现的携带污染）进行检测，无需覆盖所有项目。

3、生化分析系统新增检测项目时的评价： ①密闭检测系统新增检测项目时，生产企业应提供相关资料，评估项目之间可能存在的交叉污染； ② 当开放系统计划增加新的检测项目时，实验实验室应通过文献查阅和数据收集评估是否存在可能的交叉污染。 必要时应与生产企业设计配对实验，评估携带污染对检测结果的影响。

4、必要时评价：当怀疑一项或部分检测项目的结果以一定频率不合理、不规则地增加或减少，且室内质量控制未显示不精密度显着增加时。 ，应考虑携带污染物的存在。

(2) 样品污染评估方法

1、临床结果回顾性分析：当怀疑某项结果因样本源性污染而异常时，可观察该样本前一样本中同一项目的结果。 如果也非常高，则可以考虑样品携带污染的可能性。

2、添加显色物质进行评价，可参考中华人民共和国医药行业标准《全自动生化分析仪》（YY/T0654-2017）中提供的样品探针污染检验橙黄色G试验方案或使用不同的颜色。 原始添加剂可作为样品残留污染评估的方案。 样品携带污染率不能大于0.1%。

3、高浓度样品评价： ①临床高浓度样品样品源性污染评价方法是先检测3个或以上高浓度患者样品或质控物质，然后测定3个或以上空白物质（可以是去离子水，或不含分析物的相同基质的样品）。 ②根据CLSI EP10A3计划，采用相对复杂的实验设计和统计方法，对定量方法的截距、斜率、携带污染、非线性和漂移进行预评估。 每批次10个样品，每个检测对象分为中高、低中、中低、低高、高中、采用连续检测。 共检测5批次，计算有效批次的平均值。 多批次评估可以避免单次测量的意外误差，使结果更具代表性。 同时，共识强调每批内的顺序不得因任何原因打乱或中断，否则检测结果无效。 ③协和计划：采用携带污染与不精确评价联合评价方法，对某项检测项目在5个工作日内完成5批检测。 不同浓度样品的分选方法为低、低、低、低、高、高、高、高、空白、空白、空白，通过多批（空白1 - 空白3）/（高4 - 空白3），也可以获得两个浓度。重复性和周期精度高，相对简单且易于实现。

（三）试剂（或其他化学品）污染评估方法

1. 发生疑似试剂源污染时的一般分析流程为： ① 收集物品之间现有的交叉污染信息，包括但不限于制造商手册、制造商告示、文献资料等，找出被污染的物品可能是哪些物品受试剂污染的影响。 ②研究污染物品所在检测单元的试剂分布和检测顺序，看看是否存在已知的携带污染的“配对”。 ③ 使用试剂探针、搅拌棒、冲洗头、比色皿等相同的仪器部件来分析污染物品。 紧接着的前一项是什么？ 分析是否有携带污染的可能。 ④ 如果上述步骤表明A项目的试剂对B项目有污染，可以根据生化分析仪记录的信息，调出紧接着A项目检测B项目的保留样本，单独重新检测B项目，并对比结果。 采用一定的判断标准（如1/2 TEa）来确定检测结果与原始结果的偏差，分析是否存在携带污染的可能性。 ⑤ 如果现有信息仍不能表明疑似污染试剂携带污染，可设计实验评价该污染物品与同一检测单元内所有其他项目试剂之间是否存在交叉污染。 ⑥采用任意方法初步确认一对存在试剂残留污染的物品后，通过连续、反复测量疑似“配对”物品即可确认疑似“配对”物品，并可客观评估残留污染程度。

2.试剂残留污染的筛查测试设计。 目前，大多数实验室至少开展20个生化检测项目。 评估所有物品之间的残留污染将非常耗时并且消耗大量试剂成本。 而且不同仪器的工作原理也不完全相同。 设计相对简单、合理的实验方法是一个重要的考虑因素。 通过设置特定的样品检测顺序，每个样品只检测一项，并且可以控制不同项目的顺序，使任何一项都能满足其他项。 为了有效评估项目间残留污染的影响，残留污染实验中使用的患者样本的混合血清应尽量含有医学上确定的浓度水平。 如何检查试剂针是否被污染？ 假设本实验使用A、B、C、D、E五个项目来检查每个项目之间的试剂针传播污染。 首先，输入样本检测编号，并在生化分析仪中选择项目。 每个样品编号仅选择一个。 项目，目的是使试剂针的顺序完全按照样本检测编号的顺序绘制项目。 五个项目的测试顺序如图1所示。测试完成后，将数据输入到处理表2和3中，根据一定的判断标准寻找可能的污染项目组合。

图1 测试项目数为5时的测试顺序安排表

结果分析：实验结果如表3所示。 在表格中测试序号所代表的位置处输入该项目对应的测试结果； 将每个测试序列号对应的测试结果与该项目的5次单独重复结果的平均值进行比较。 ; 该比率以百分比的形式表示，通过分析百分比可以初步判断携带污染的可能性。 目前的判断标准：以正负5%作为判断标准。 如果超过范围，则怀疑存在污染。 通过初步携带污染实验，筛选出疑似污染的项目组合。 假设（A→B）与（D→E）相同，即项目A对抗项目B（项目A检测完成后，立即测试项目B），项目D对抗项目E D项目（D项目检测完后立即检测E项目）疑似被污染。 由于预实验的项目交叉结果只是一次测试的结果，可能存在偶然因素，必须进行验证实验。 操作方法是先单独测试A项，然后连续测试B项3次。 第一项B的结果受A项的影响最大。第三项B的结果更准确，因为它被刷新了两次。 将第一个B项目的测试结果与第三个B项目的测试结果进行比较。 如果影响百分比与初始实验结果的影响趋势和程度相似，则可以判断项目A给项目B带来了污染。项目D也是如此。

3.样品针携带污染调查。 目前，全自动生化分析仪大多采用循环冲洗样品针来吸取样品。 当样品针未完全清洁或粘附能力增大时，样品残留可能会影响下一个相邻样品的测试结果。 造成影响。 原因有冲洗水冲洗不充分、取样针堵塞、聚四氟乙烯涂层剥落、取样针弯曲等。 排除方法采用同一检测项目的A样（高浓度）和B样（低浓度/去离子水），浓度相差较大。 测试顺序为A1、A2、B1、B2、B3，计算公式为Q=(B1-B3)/(A2-B3)*100%，根据Q小于10%判断结果。 局限性：结果与所选样品浓度有关。 因此，使用该方法评估样品针污染情况时需要考虑样品的实际浓度。

4. 携带比色皿时检查是否有污染

生化分析仪的比色皿一般分为两种，一种是回收的，另一种需要定期更换。 每个比色皿测试完毕后，会自动清洗，然后继续进行下一个项目。 当比色皿因各种原因清洗不彻底或老化时，比色皿上吸附的前一个项目残留的试剂或反应物可能会影响该比色皿中的下一个过程。 一个项目的测试结果是有影响的。 目前生化分析仪大多采用多级清洗剂和清洗水来清洗比色皿。 清洗系统包括碱性清洗液和酸性清洗液，帮助实验室工作人员清洗样品针和管道系统。 此外，还有相应的软件专门分析比色皿的功能，以帮助确认不良结果。 一般有两种方法。 您可以输入数据较差的项目，系统会显示所有测试过该项目的比色皿编号； 您还可以指定比色杯编号，系统将显示该比色杯测试过的所有项目。

5 多因素试剂污染源分析实验设计

不同的生化分析仪往往有不同的硬件设计。 当生化分析系统有多个试剂探针、多个搅拌棒等部件时，可以根据实际情况优化评价方案。 通过不同的排列组合，可以确认被污染的物品。 在此基础上，进一步确认携带污染发生的地点。 例如，当生化分析仪每台有两个试剂探头交替使用，三个搅拌棒交替使用时，测试可设计为X、A、XA1、XA2、XA3、B、XB1、XB2、XB3……。 ...，此时试剂探针携带的污染率应为(XA2 -X)/X，搅拌棒携带的污染率应为(XA3 -X)/X。 由于比色皿数量较多且差异较大，因此评价较为复杂，但总的原理是相同的，即相同的生化分析仪组件，如探针、搅拌棒、比色皿等，可以靠近受污染物品和受污染物品使用。

携带污染的解决方案

1. 通过优化试剂/项目设置

许多生化分析仪将多个独立的分析模块组合成一台全自动生化分析仪。 每个模块装载不同的试剂，设置不同的检测项目。 一般情况下，在安排项目顺序时，要求两个项目之间至少有一个互不干扰的项目。 最彻底的做法是将被干扰的项目放在干扰项目之前，以消除干扰的可能性。 同时要求检验人员对仪器的工作状态有透彻的了解，在为一个样品选择项目或选择一个样品的最后一项和下一个样品的第一项时，要考虑到仪器的可能情况。试剂所携带的污染并作出合理安排。 项目顺序是为了获得更加合理的测试结果。 还有一些生化分析仪可以在同一个分析模块中使用相对独立的硬件，在不同通道中完成不同的检测项目。 例如，自动生化分析仪设有内外圈比色杯，并使用相对独立的试剂针。 、搅拌器和冲洗头。 利用仪器的这些硬件特点，可以将两个携带污染的项目设置在两个互不干扰的检测单元上，从根本上避免了携带污染的发生。 临床实验室更新全自动生化分析仪时，如果没有项目变更，建议直接复制原有设备参数，不要轻易改变项目设置和检测顺序，避免不必要的潜在交叉污染。

2.设置专用冲洗程序

目前常见的生化分析仪通常都具有可编辑的冲洗方式，用户可以自定义冲洗菜单。 值得注意的是，确实由于特殊项目试剂的常规清洗难以消除残留污染，可以设置残留污染参数来加强清洗，避免干扰。 基于一组“配对”的项目，设置专门的清洗程序，包括：设置清洗组件（试剂探头、搅拌棒、比色皿）、清洗次数、清洗液量等； 选择洗涤液类型（通常是酸性洗涤液、碱性洗涤液和胰蛋白酶洗涤液）和纯水等。对于开放系统，可以通过分析所携带的污染物来选择洗涤液的类型。 例如，对于Cu2+、Ca2+、Mg2+等阳离子的污染，可选择酸性洗涤液； 对于酶、抗原、抗体等蛋白质干扰，可选用碱性洗涤液； 鉴于不同色原物质所带来的污染，可根据色原的种类选择合适的酸性或碱性洗涤液。 一般来说，只有在确认通过仪器维护、更换备件等无法解决所携带的污染物后，才必须选择特殊的冲洗程序，并且不宜调整项目设置，因为额外的冲洗程序会显着增加数量步骤。 既消耗时间又降低检测效率。 同时，还应充分评估项目的检测次数和可能携带污染的频率。

3、加强仪器设备的维护保养

残留污染的最根本原因是上次测试残留物的清洁不充分。 因此，许多造成临床影响的便携式污染往往是在仪器设备老化、预防性维护不力、备件未及时更换等情况下发生的。 例如，未按要求定期更换比色皿导致附件增多、未按维护要求检查采样针等。实验室应严格按照要求进行维护（日维护、周维护、月维护）。保养（按时保养、季度保养、年度保养、不定期保养），并定期进行污染评估。 例如，清洁或定期更换探头、搅拌棒、比色皿、管道等常用备件； 检测工作量大的实验室应定期检查探头、搅拌棒表面涂敷的防粘材料是否脱落。 检查是否有粗糙、不平整等现象； 检查搅拌棒位置是否正确，是否有搅拌飞溅等异常情况； 检查废液吸入管路是否密封良好，比色杯内是否有残留废液。 必要时，特别是当携带污染频率增加时，应尽快更换探头、搅拌棒、比色皿、管道等备件。

总结

全自动生化分析仪发展迅速，具备处理多项目、多样本的能力，检测速度不断提高。 但由于分析系统中检测项目、试剂成分、反应产物、检测原理等的复杂性和多样性，仍存在未知携带污染的可能。 这会给我们带来新的麻烦，是生化检测系统不可避免的问题。 生化分析仪所携带的污染可能会产生错误的检测结果，并可能对临床结果产生负面影响。 是现阶段自动生化分析系统检测结果准确性的主要挑战之一。 需要临床生化工作者高度重视并有效预防。 临床生化工作者在日常工作中应注意识别隐藏的残留污染。 同时，有目的地、有计划地研究残留污染的系统解决方案，减少残留污染造成的结果偏差和对患者诊疗的影响。