会议提醒 | 基因疗法中的腺相关病毒(AAV)分析难点
基因治疗通常需要有效的载体用于递送外源基因,在保护外源基因完整递送的同时也与特定细胞形成靶向的相互作用。腺病毒相关载体(AAV)是一类常见的基因治疗载体。
随着腺病毒作为基因治疗的药物运载载体不断地发展,需要更有效的分析方法来评估和确保聚集体等腺病毒的关键质量属性 (Critical quality Attributes, CQA) 能符合要求。
病毒颗粒聚集体作为产品相关杂质,是一项非常重要的纯度与杂质质量属性。由于形成聚集体可能会导致病毒载体的效力丧失与免疫原性的改变,所以需要对聚集体进行预防性的定量分析。
对AAV聚集体的测定通常采用超速离心法(Analytical Ultra Centrifugation, AUC)。但众所周知,AAV样品的量本来就非常有限,但AUC方法需要大量的AAV样品。在需要进行重复实验时,AUC的局限性使得分析进一步复杂化,并且利用有限的样品很难兼顾到额外的CQA 检测需求。体积排阻色谱法(SEC)是一种广泛应用的聚集体分析技术,并且已被证明可以作为AAV聚集体分析的有效解决方案。
在本文中,我们重点介绍了Biozen dSEC-7 SEC-FL解决方案,该方案可以在10分钟内进行稳定可靠的AAV聚集体分析,且仅需要0.5 μL样品。为了确定上样量对聚集体和单体间的分离度和聚集体检测的影响,我们将4种不同血清型(AAV2,5,8,9)分别以0.5-2μL之间的体积进样。
LC方法条件
色谱柱:Biozen 3μm dSEC-7
规格:150x4.6mm
货号:00F-4789-E0
流动相:20mM 磷酸钠,pH6.6+350mM 氯化钾
流速:350μL/min(等度)
温度:25℃
进样量:0.5μm,1μL,2μL
系统: UPLC
检测器:FLR-Ex 280nm,Em 350nm
进样频率:40Hz
样品:
1. AAV2-CAG-GFP,2E13vg/mL
2. AAV5-CMV-GFP,2E13 vg/mL
3. AAV8-CMV-GFP,2E13vg/mL
4. AAV9-CMV-GFP,2E13 vg/mL
在所有的进样体积条件下,AAV5、AAV9单体和聚集体分离度均在1.5和2.0之间。在所有不同上样量的实验中,聚集体的含量百分比均保持一致,说明Biozen dSEC-7色谱柱与高灵敏度的荧光检测相结合,可以在上样量低至0.5μL时也能提供准确的检测和分离。
图1. 不同上样量条件下AAV2单体和聚集体的分离
图2. 不同上样量条件下AAV5单体和聚集体的分离
图3. 不同上样量条件下 AAV8单体和聚集体的分离
图4. 不同上样量条件下 AAV9单体和聚集体的分离
Biozen dSEC-7通过优化的孔径和柱规格,以及增强的填料化学性质,提升了色谱柱分离度。这一系列的色谱柱能确保在不影响数据质量的前提下快速得出实验结果,使得研究人员能够自信地做出关键决策。较短的柱长和较窄的内径,不仅提升分析速度,更能节省宝贵的样品。
订购信息
Biozen?产品-生物兼容的硬件支持
(点击查看大图)
扫码获取原文应用文献
此外,飞诺美联合医麦客隆重邀请您参加《量“体”而出,”聚“焦基因疗法研究进程——使用新型尺寸排阻颗粒克服AAV聚集体分析的挑战》新品推介研讨会,会上,我们将向您逐步揭晓全新体积排阻色谱柱Biozen dSEC-7产品的独特性表现。我们还将和您一同探索多种血清型AAV在不同流动相及多种检测器的方法通用性的实际案例。2024年3月28日下午14点,期待和您一同见证这款产品的强大魅力!
全部评论(0条)
推荐阅读
-
- 会议提醒 | 基因疗法中的腺相关病毒(AAV)分析难点
- 会议提醒 | 基因疗法中的腺相关病毒(AAV)分析难点
-
- 甲流乙流流感病毒采样保存管可配保存液哪有卖?深圳美迪科生物
- 甲流乙流流感病毒采样保存管是一种专门用于流感等多种病毒保存及运输的医疗器械塑料容器,通常需要搭配采样拭子和保存液一起使用,可用于多种样本的长时间保存及运输。
-
- 一次性使用病毒采样管用于流感、支原体等标本的采集保存及转运
- 一次性使用病毒采样管用于新冠病毒、流感病毒、禽流感、手足口、麻疹、诺如、轮状等病毒标本以及支原体、脲原体、衣原体标本的采集保存及运送,通常在人体的口腔、咽喉、鼻咽、肠道等部位采集样本然后进行保存运输。
-
- 肺炎支原体、呼吸道合胞病毒、甲流流感咽拭子生产企业哪家好?美迪科生物
- 肺炎支原体、呼吸道合胞病毒、甲流流感是常见的呼吸道病原体,可以通过咽拭子、口咽拭子和鼻咽拭子等方式进行标本采集。由专业医护人员操作,采集方法是非侵入性的,简单、安全且无痛苦,可以为临床提供准确的依据。
-
- 展会回顾 | 第二届深圳国际安全健康测试学术会议暨深圳市分析测试协30周年年度大会
- 展会回顾 | 第二届深圳国际安全健康测试学术会议暨深圳市分析测试协30周年年度大会
-
- 网络研讨会 | Turbiscan稳定性分析仪如何改善现代食品和饮料以满足未来需求
- 加入我们即将到来的关于Turbiscan稳定性分析仪如何改善现代食品和饮料以满足未来需求的网络研讨会。 \x26amp;n
-
- 5月30日 14:00新品网络直播 | 更精密的现场光谱化学分析
- 5月30日14:00开播!重点介绍新品-SPECTRO xSORT 手持式荧光(ED-XRF)光谱仪在现场分析中的应用。特邀广州分析测试中心刘日威老师介绍XRF样品前处理技术。
-
- 会议回顾 | 新诺仪器助力的第二届新能源材料创新发展论坛取得圆满成功!
- 五月,春未尽,夏初临。上海新诺仪器集团有限公司于5月24日参加了第二届新能源材料创新发展论坛暨新能源产业发展深度赋能大会,会议在南京富力万达嘉华酒店盛大开幕。
-
- 展会回顾 | 深圳市分析测试协会年度大会圆满举办
- 展会回顾 | 深圳市分析测试协会年度大会圆满举办
-
- 【仪路寻光,闪药未来】成都站--生物制品质量研究与控制技术研讨会议程已出,即将开启
- 【仪路寻光,闪药未来】成都站--生物制品质量研究与控制技术研讨会议程已出,即将开启
①本文由医疗器械网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表医疗器械网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:医疗器械网"的所有作品,版权均属于医疗器械网,转载时须经本网同意,并请注明医疗器械网(www.120med.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi
参与评论
登录后参与评论