【内含福利】小鼠造模不用慌,MP饲料来帮忙!
动物疾病模型饲料可以用于模拟疾病,包括肥胖、心血管疾病、糖尿病等,在科研领域的应用越来越广泛,药物开发、组织工程和再生医学、基因治疗等领域发挥作用。本文将重点介绍高脂饲料诱导的动物疾病模型及其造模注意事项。
当前肥胖问题是人们关注的重点,随着司美格鲁肽等减肥药物的上市,再次掀起减肥药物开发的热潮。高脂、高能量饮食诱导的大小鼠肥胖模型,常用于肥胖相关疾病发病机制研究、减肥药物开发等。
高脂食物、高热量食物均可引起肥胖,高脂肪饮食中比较常见的饲料为45%高脂饲料(02960452)和60%高脂饲料(02960449),少数研究中有高达70%高脂饲料。高脂饲料的选择最终取决于研究目的。
目前部分研究表示:
45%高脂饲料:该饲料比较适合诱导大鼠肥胖模型。
60%高脂饲料:该饲料比较适合诱导小鼠肥胖模型,大鼠对该饲料可能存在进食量降低的情况。
普通大鼠(SD大鼠,Wistar大鼠)、自发性高血压大鼠(SHR)、各种品系的小鼠(例如C57)都是被广泛用于肥胖研究的模型动物。肥胖造模常用C57BL/6J雄性小鼠,其具有肥胖遗传倾向,在6周龄时即可观察到对高脂喂养的敏感性。采用该小鼠造模需要注意:
性别:雄性比雌性敏感。
替补小鼠:如果受其他因素影响,有小鼠体重持续下降,可以使用替补小鼠继续实验。
环境饮食对肥胖的作用:C57BL/6J对环境因素很容易引起应激反应,从而有可能出现体重不增甚至下降(变瘦)。
肥胖模型造模周期一般为8-12周,12周最佳,可根据实验情况选择合适时间。
通常情况:6周龄(20g左右)C57BL/6J小鼠开始造模,饲喂高脂饲料至13-14周龄,体重可达35g;饲喂至16周龄体重可达40g左右.
客户案例:使用MP提供的60%高脂饲料饲喂C57BL/6J小鼠75天,体重增长折线图。
小鼠食量预估:小鼠每天的进食量可按照5g/天/只,大鼠为25克/只/天。 勤换垫料:优先选用优质刨花垫料,不建议使用玉米垫料等,可能影响小鼠进食。每周可1-2次更换垫料,若发现笼内垫料中出现较多碎料,建议及时更换垫料。 高脂饲料的储存与更换:由于脂肪含量较高,室温容易发生变质等问题,饲料至少应储存在4°以下的环境中,并且饲料最好每1-2天更换一次防止变质。 饮水充足:保证供水充足,脂肪含量高饲料喂食后,小鼠饮水会增加。 适应性喂食:动物从普通饲料转为高热量、高脂饲料,需要逐渐过渡,不宜突然完更换为高脂饲料,容易导致适口性差,食量下降。 小鼠食量:记录小鼠食量,若食量突然下滑,可能是进入厌食期(多发于高脂造模),应及时排查原因。啮齿类动物需要磨牙,建议放置磨牙棒或者定期剪牙齿,这样也能减少了饲料的浪费。
II型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)是最常见的糖尿病类型,在基础医学研究中多种方式诱导II型糖尿病,以诱发性模型、自发性模型最为常见,其中高脂饮食联合链脲佐菌素(02100557)进行造模的方式应用较多。
高脂饮食诱发小鼠胰岛素抵抗,再腹腔注射低剂量STZ,造成胰岛β细胞轻度损伤,诱发胰岛素代偿性分泌障碍,进一步导致小鼠高血糖[1]。
6周龄C57小鼠饲喂高脂饲料3个月左右,与对照组小鼠出现显著体重差异。
腹腔注射STZ连续低剂量注射5天,注射剂量与高脂饮食时间相关,高脂喂养时间长,注射适当剂量减少。
不同剂量STZ对T2D小鼠成模率(A)和死亡率(B)的影响[2]
注射完成后,每隔3天检测小鼠空腹血糖,当空腹血糖≥11mmoL/L,证明模型成功。(未达到标准空腹血糖,可再连续低剂量注射STZ。)
注意观察高脂饮食时,小鼠体重情况,出现异常时及时排查原因。
注意STZ注射剂量,防止注射剂量过低造模失败,过高导致小鼠死亡。
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参考文献:
[1] 桑延霞,张军军.膳食联合STZ诱导胰岛素抵抗的2型糖尿病大鼠模型的建立[J].广东药科大学学报,2019,35(6):789-792.
[2] 左心真,王蒙蒙,董晓.2型糖尿病小鼠模型的建立[J].青岛农业大学学报(自然科学版),2022,39(04):259-264.
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