EAD Talk | 声音专栏:探秘EAD与CID解离技术的协同优势
请戴上耳机聆听婷声音
大家好,我们又见面了。上期内容,大家了解了EAD(电子活化解离技术,electron activated dissociation)研发背景和ZenoTOF 7600高分辨质谱系统中EAD的工作原理。从上期内容中,大家了解到CID技术是基于气体介导的解离技术,EAD是基于电子介导的解离技术,两者因碎裂原理不同,所以MS/MS信息具有互补性。本期内容我们从大、小分子碎裂的实际例子出发,看看EAD在碎裂信息上到底和CID有什么不同,帮助我们精准理解EAD和CID的互补性。
本期内容概要
首先,我们先来看大分子。EAD工作时,如果运动能量KE<10eV时,我们就进入了ECD或HotECD模式,这两种模式在多电荷大分子碎裂上的应用由来已久1,2。传统的CID碎裂模式主要碎裂多肽的酰胺键(O=C-N),形成b、y离子;这种弱键断裂不仅无法有效确认蛋白质的修饰位点,也不能测定蛋白质中的二硫键,甚至在测序过程中还无法区分亮氨酸(Leu)和异亮氨酸(Ile),天冬氨酸(Asp)和异门冬氨酸(IsoAsp)等异构体。然而,EAD碎裂模式断裂的是多肽的N-Ca形成c、z离子,或是断裂S-S键2,同CID解离化学键的位置不同,更能解决蛋白修饰位点,二硫键位点和氨基酸异构体的难题(图1)3。
图1. 不同碎裂模式对多肽股价碎裂位点3
在小分子应用中,当EAD调整运动能量KE>=10eV,就开始进入EIEIO模式。我们使用化合物利血平来看看CID和EAD技术的互补性,图2中展示了,EIEIO模式下,产生了不同于CID的5个离子碎片(m/z 251.1176,m/z 381.1814,m/z 414.2135,m/z 550.2637, m/z 594.2564),观察5个碎片断裂位点可以发现,其中的某个主要断裂位点是在C-C键上,这个断裂位点在CID模式中很少见;同时,我们可以发现CID谱图中丰度较高的碎片离子,在EIEIO谱图上没有或丰度较低。这都说明了CID和EAD技术的MS/MS信息的互补性。
图2. EIEIO MS/MS谱图与CID MS/MS谱图信息的互补性
为了更好地了解EAD碎片特点,检索利血平GC-MS的电子轰击离子源(EI源)碎片谱图,从表1中可以发现,EAD碎片和EI碎片具有相似性,7个主要EI源的碎片,在EAD碎片信息中能发现6个,而在CID碎片中仅仅能发现2个4。虽然很难说清楚EIEIO碎裂技术和EI源的碎裂有什么相似性,也没有文献比较过这两种技术,但这从侧面说明了CID和EIEIO的互补性,EIEIO碎片和EI这种硬电离模式产生的碎片可能存在某种关联性。
表1. GC-MS-EI模式下主要碎片,与EAD和CID模式下碎片比较分析
EIEIO技术和EI源碎裂的另一个相似处就是,都会产生自由基离子。在EIEIO谱图中,自由基碎片离子和它的+/- H碎片往往形成了共生峰,它们因断裂位点的结构不同而展示不同的丰度,这也成为EIEIO碎片离子的一个特点(图3)5。Takashi等人就应用这个特点,比较不同KE能量下,自由基碎片和其+/- H碎片丰度比的变化,判断磷脂酰胆碱(PC)酰基脂肪链的顺、反异构6。
图3. PC 16:1(n-7,cis)/16:1(n-7,cis)(上图)和PC 16:1(n-7,trans)/16:1(n-7,trans)(下图)在EIEIO碎裂模式下,双键位点n=7前后位点n-6和n-8的C-C断裂产生的自由基和其+/- H碎片丰度差异
听了上面的内容,不知道大家是不是对EAD和CID技术的互补性,有了更深入的理解。最后,我们来总结一下本期的内容:
1
当EAD的KE<10eV时,进入ECD和HotECD模式,可以断裂N-Ca键和S-S键,解决蛋白修饰位点,二硫键位点和氨基酸异构体的难题;
2
当EAD的KE>=10eV时,进入EIEIO模式,其断裂位点和CID的弱键断裂有所不同,和EI源碎片比较,有一定相似性;
3
EIEIO模式下产生的自由基碎片和其+/- H碎片的比例,也许能为深度结构解析提供应用空间。
本期的主要内容,就到这里了。后面几期内容,我们将按照脂质、生物药、蛋白组学、药物等不同应用分类,用具体的应用场景介绍EAD的应用,让大家更能了解EAD能解决那些问题。谢谢大家的收听,我们下期再见。
应用文集注册获取
白皮书-电子活化解离 一种全新质谱分析模式
EAD (Electron activated dissociation)
电子活化解离应用案例
扫码注册获取以上资料
参考文献
上下滑动查看
相关· 阅读
EAD Talk | 基于脂质分子可变域组合分子结构驱动的磷脂酰胆碱(PCs)双键位置异构体UPLC-MS/MS定性、定量策略
EAD Talk | 声音专栏1期:结构解析利器- EAD研发、原理及特点(1)
EAD Talk | 文献分享:分子网络-电子活化解离(EAD)技术增强代谢物注释
更多婷视角声音专栏 点这里
声明:版权为 所有。欢迎个人转发分享。其他任何媒体、网站如需转载或引用本网版权所有内容须获得授权, 转载时须注明「来源:」。申请授权转载请在该文章下“写留言”。
喜欢就点在看哟
全部评论(0条)
推荐阅读
-
- EAD Talk | 声音专栏:探秘EAD与CID解离技术的协同优势
- EAD Talk | 声音专栏:探秘EAD与CID解离技术的协同优势
-
- 拉曼光谱技术用于聚合物的鉴定与表征
- 拉曼光谱技术用于聚合物的鉴定与表征
-
- 医用超声波清洗机的应用与优势
- 医用超声波清洗机的应用与优势
-
- 守护水质安全,科技精准探秘:水中缩醛类物质的高效检测方法
- 守护水质安全,科技精准探秘:水中缩醛类物质的高效检测方法
-
- 讲座预告 | 离心分配色谱技术在中医药有效成分提取和分离中的应用
- 中药化学成分复杂,有效成分的得到需要采用合适的提取方法并进一步分离、纯化。随着现代化工业工程技术的迅猛发展,一些现代高新技术不断被应用到中药研究、开发和中药生产中来,大大促进了中药产业的发展,使中药制药技术水平上升到一个新的高度。
-
- 5个步骤掌握FISH技术:高效探索微生物世界
- 荧光原位杂交技术(FISH)是一种强大的分子生物学工具,它允许研究者在保持细胞形态完整的条件下,检测和定位特定
-
- 邀请函 | 第十六届中国国际电池技术展览会
- \x26amp;nbsp;第十六届中国国际电池技术展览会\x26amp;nbsp;\x26amp;nbsp;在电池技术的飞速发展中,我们迎来了2024
-
- 创新2024|CEPT技术革新,Gibco CultureCEPT添加剂重塑细胞存活新高度
- 创新2024|CEPT技术革新,Gibco? CultureCEPT?添加剂重塑细胞存活新高度
-
- X射线衍射(XRD)技术用于选矿过程的4个优势特性
- X射线衍射(XRD)技术用于选矿过程的4个优势特性
-
- 手持式光谱分析仪在稀土元素的识别和勘探中的应用优势特性
- 手持式光谱分析仪在稀土元素的识别和勘探中的应用优势特性
①本文由医疗器械网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表医疗器械网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:医疗器械网"的所有作品,版权均属于医疗器械网,转载时须经本网同意,并请注明医疗器械网(www.120med.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi
参与评论
登录后参与评论