CAR-NK细胞治疗的新赛道：自身免疫疾病-医疗器械网

CAR-NK细胞治疗的新赛道：自身免疫疾病

来源：Cytiva（思拓凡）分类：操作使用 2024-04-23 10:45:08 7阅读次数

在今天的医学和生物技术领域中，创新的治疗方法正在不断涌现，改变着我们对疾病治疗的传统认识。全球范围内已有12款细胞治疗药品成功获批上市，从血液瘤到实体瘤，细胞治疗逐渐突破多个应用领域。除此之外，细胞治疗产品在自身免疫疾病的应用上也展示了巨大的前景。

自身免疫疾病是由免疫系统错误地攻击身体自身组织引起的，这种疾病不仅难以治愈，还会给患者带来长期的痛苦。自身免疫疾病发生时，免疫系统错误地攻击和破坏健康的体细胞，导致炎症和组织损伤。细胞治疗的目标是恢复免疫系统的正常功能，减少自身攻击，实现疾病的长期缓解。

最近，CAR-NK（嵌合抗原受体修饰的自然杀伤细胞）细胞治疗作为一种新兴的免疫治疗方法，显示出在这一领域的巨大潜力。与传统治疗相比，CAR-NK细胞治疗在安全性、效率和精确性方面具有明显的优势。下面，我们将详细探讨CAR-NK细胞在自身免疫疾病治疗上的优势，以及这一技术为患者带来的希望。

CAR-NK细胞

在自身免疫疾病治疗上的优势

靶向性

CAR-NK细胞通过基因工程获得了识别和绑定特定抗原的能力。在自身免疫疾病中，这些细胞可以被设计成靶向那些异常表达或过度活跃的自身免疫细胞，如错误攻击身体组织的免疫细胞。这种高度的靶向性能减少对健康细胞的损害，降低了治疗相关的副作用，提高了治疗的精准性。

安全性

相较于CAR-T细胞治疗，CAR-NK细胞治疗通常具有更低的细胞因子释放综合症 (CRS) 和神经毒性风险。CRS是一种由大量细胞因子快速释放引起的系统性炎症反应，而NK细胞天生的生物学特性使得它们在激活后释放的细胞因子较少，从而减少了引起严重CRS的风险。

快速反应和宽泛的免疫监视

NK细胞作为先天免疫系统的一部分，能够迅速响应外来威胁，无需事先的免疫原特异性识别。这使得CAR-NK细胞能够在体内迅速定位到靶细胞并发挥作用，提供即时的治疗效果。此外，NK细胞还具有监视多种免疫逃逸机制的能力，这在处理复杂的自身免疫疾病环境中尤为重要。

减少长期免疫抑制的需求

由于CAR-NK细胞可以精准地靶向和消除病理性免疫细胞，它们有潜力减少对长期免疫抑制药物的依赖。这对于那些可能因长期使用免疫抑制剂而遭受严重副作用的患者来说是一个重大的好处。

来源更广泛

CAR-T细胞大多来源于患者自体或人类健康供体细胞，NK细胞可来源于包括外周血 (PBMC) 、CD34+造血祖细胞 (HPC) 、脐带血 (UCB) 、诱导多能干细胞 (iPSC) 、NK-92等细胞系。

自身免疫药物市场稳步增长

为患者带来希望

经统计，全球自身免疫疾病治疗药物处于稳定增长的趋势，全球自身免疫性疾病治疗市场预计将从2020年的1,206亿美元增长到2025年的1,461亿美元，复合年增长率为3.9%。该领域仍然存在大量未被满足的临床需求，目前已上市的许多药物存在作用疾病不具备针对性、患者响应率低下、副作用大等问题，而CAR-NK治疗自免有着多方位的优势和良好的疗效，对于某些难治性自免疾病也有较好的效果。因此，国内外有多家企业布局CAR-NK疗法以实现差异化竞争。2023年11月，Nkarta宣布FDA批准了其CAR-NK细胞疗法NKX019治疗狼疮性肾炎 (LN) 的IND申请，NKX019是一种同种异体CAR-NK疗法，通过工程改造表达CD19靶向CAR来增强细胞靶向性，并表达专有的膜结合形式的IL-15，在没有外源性细胞因子支持的情况下具有更强的持久性和活性。

图片来源：Nkarta披露

2023年12月，恩瑞恺诺与上海长海医院首次披露国际上首例利用CAR-NK治疗系统性红斑狼疮的临床报告，“CD19靶向的CAR-NK细胞治疗复发/难治的系统性红斑狼疮”的研究者发起的临床试验研究，已完成4例重度系统性红斑狼疮患者的CAR-NK回输治疗。4名重度患者经该细胞治疗后，均实现了深度缓解，由“重度”转为“轻度”，并表现出相应的持久性。其中，2例重度患者经15天治疗即达到深度缓解，SLEDAI-2K疾病评分由14分和17分（重度病症）分别降至1分和3分（轻度病症），展现出非常积极的CAR-NK细胞治疗效果。

2024年2月，先博生物的靶向CD19的CAR-NK正式获得CDE的临床默示许可，适应症为中重度难治性系统性红斑狼疮 (SLE) 。这是SLE适应症在国内首个通用型NK产品获批IND，临床进度甚至有望成为全球领先。

CAR-NK制备中的挑战

及产品解决方案

目前，在CAR-NK的制备上仍然存在大量的挑战。

首先，NK细胞治疗需要完全清除T细胞，以避免GVHD

NK细胞来源非常广泛，比如外周血、脐带血、胚胎干细胞、人类诱导多能干细胞和NK细胞系。而从血液来源的PBMC中分离NK细胞无疑是最安全和方便的方法。NK细胞占所有循环淋巴细胞的约15%。终末分化的NK细胞缺乏B淋巴细胞 (CD19-) 和T淋巴细胞 (CD3-) 的表型标记，CD56是NK细胞特征的标志。

Sepax C-pro采用完全封闭的管路耗材，利用NeatCell程序，可以轻松实现全自动的从包括外周血、单采血和脐带血等来源的样本中分离单个核细胞，然后利用BeadCell程序完成TMNC和相应磁珠的孵育，从而方便进行后续的阳选或阴选，能够得到纯净的NK细胞族群。

Sepax C-Pro细胞处理仪

其次，NK细胞体外培养扩增仍然是一项挑战

NK细胞的半衰期大约为7～10天，因此CAR-NK细胞治疗方案往往需要培养大量的NK细胞回输病人。单个供体的NK细胞数量不足以进行治疗，这使得NK细胞的扩增和激活变得非常关键。通常需要两到三周来培养NK细胞。

Xuri W25细胞扩增系统，以波浪式摆动培养悬浮的NK细胞。培养体积从300 mL到多至10 L，在密闭体系中轻松扩增NK细胞。而Xuri W25细胞扩增系统独有的pH和DO的在线实时监控，可以对细胞生长状态保持监控，同时灌流系统可以有效的提高细胞培养密度。同时，的Xuri细胞因子IL-2、IL-15和IL-21，可以让NK细胞培养摆脱滋养细胞的依赖，免除后续杂质污染的风险。

Xuri细胞扩增系统W25

最后，NK细胞对冻融过程敏感

解冻后NK细胞的存活率和细胞毒性显著降低。为了使细胞冷冻保存成为可行的最佳策略，必须对冷冻NK细胞进行探索。

提供无液氮式的程序降温仪VIA Freeze和干热式的VIA Thaw，可以满足GMP级别生产环境中使用。VIA Freeze无液氮程序降温仪可以精确的以0.1-2℃/分钟的速率降温，也可以自定义降温策略，最大化的保持冻存中细胞活力；而VIA Thaw干热式复苏仪，操作简便，可以使复苏过程完全摆脱对水浴锅的依赖的同时，能够记录整个复苏过程中温度变化曲线，完全监控复苏过程。VIA Freeze和VIA Thaw共同完成CAR-NK细胞生产的最后一环，确保CAR-NK细胞治疗的疗效。