医疗器械网(120med.com)欢迎您!

| 登录 注册
网站首页-资讯-专题- 微头条-话题-产品库- 品牌库-搜索-供应商- 展会-招标-采购- 社区-知识-技术-资料库-直播- 视频-课程

技术中心

当前位置:医疗器械网> 技术中心>iPSC工作流程鉴定,Cells-to-CT让核酸水平检测更快速、更简单

iPSC工作流程鉴定,Cells-to-CT让核酸水平检测更快速、更简单

来源:赛默飞世尔科技生命科学产品      分类:科技文献 2024-05-17 10:45:04 16阅读次数

2012年诺贝尔生理学或医学奖得主山中伸弥于2006年首次实现了将体细胞重编程为具有人胚干细胞特性的多能性细胞,即诱导多能干细胞(Induced Pluripotent Stem Cells, iPSC)。iPSC具有多向分化和强大自我复制潜能,在疾病研究、药物筛选、细胞治疗、再生医学等领域具有广阔的应用前景。

图1. 将体细胞重编程为iPSC。

Takahashi & Yamanaka (2006). Cell 126:663 – 676.













iPSC 工作流程


iPSC 经典工作流程包括:体细胞获得、重编程、培养、改造、分化及分析和检测。在重编程、改造、分化步骤都需要进行核酸水平、蛋白水平、细胞水平的鉴定。

图2. iPSC经典工作流程。

iPSC重编程


不同的重编程方法可以按照是否会整合到细胞基因组,而归类为整合、可移除、非整合三种。非整合重编程技术,即使用小分子或蛋白质将重编程因子传递到细胞中,不涉及将基因插入宿主细胞的DNA,虽然相对来说效率较低,但更为安全。

图3. 不同重编程技术的安全性和效率。在每一类中,各种技术按照其效率从高到低排列。  

核酸水平快速鉴定


在iPSC工作流程中,可使用Invitogen TaqMan? Cells-to-CT? Express 试剂盒进行核酸水平快速鉴定,包括仙台病毒的残留检测以及基因表达的分析。无需RNA纯化,从培养的干细胞样品直接进行RT-qPCR,和传统TRIzol提取RNA、反转录、PCR的流程相比,能获得一致的结果,但更加快速简便

图4. 某客户SeV清除实验。使用TaqMan Cells-to-CT Express 试剂盒对不同代次 iPSC 克隆进行 SeV 基因检测,RT-qPCR结果显示P15代相较于P9、P10和P11代,仙台病毒残留明显减少。根据几次实验结果推测在第15-16代,仙台病毒彻底清除。

Invitrogen? TaqMan? Cells-to-CT? Express试剂盒


  • 简单快速—5分钟内完成96个样品制备用于RT-qPCR

  • 无需RNA纯化—无需加热、离心,可直接在培养板中裂解样品

  • 性能出众—可以从10到105个细胞中获得一致的准确性、可重复性和灵敏度

  • 经过验证—兼容20多种细胞系,预先优化的全套试剂盒

标签:

参与评论

全部评论(0条)

获取验证码
我已经阅读并接受《医疗器械网服务协议》

推荐阅读

版权与免责声明

①本文由医疗器械网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表医疗器械网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。

②凡本网注明"来源:医疗器械网"的所有作品,版权均属于医疗器械网,转载时须经本网同意,并请注明医疗器械网(www.120med.com)。

③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。

④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi

关于作者

作者简介:[详细]
最近更新:2023-09-18 16:20:36
关注 私信
更多

最新话题

最新文章

作者榜